星戈瑞简介-红色荧光蛋白/绿色荧光蛋白以及其他类型荧光蛋白
荧光标记策略是自发荧光蛋白、小分子荧光标志物染料、纳米晶体材料(即量子点材料)、小分子蛋白质标签等等这些材料都可以作为荧光标志物,结合荧光成像检测仪器可以对目标蛋白的表达情况、细胞中的定位情况、相互作用、活性状态等指标进行研究。
在绿色荧光蛋白被发现后,科学家从珊瑚虫中分离出了能在紫外照射下发出红色荧光的蛋白质—红色荧光蛋白 (RFP) 。相比于GFP,它有更高的荧光强度,成像背景低,并能激发和发射更长的波长。
代谢标记法标记蛋白荧光及其应用
Cy3-B荧光染料属于合成聚甲炔染料的花菁类染料。它的最大吸光度为559 nm,最大发射波长为570 nm。花青染料通常能够在聚甲炔周围发生异构化/反式异构化,这可能导致激发后失去荧光,信号较弱。
香豆素染料的Stokes 位移大、光稳定性好、对细胞的穿透能力强,因此香豆素染料可应用于细胞学等生物领域。
荧光素是常见的荧光染料之一。其与强碱反应生成荧光素盐,易溶于水,并有强烈绿色荧光,荧光量子产率0.65(pH=7水溶液),可使许多生物具有荧光的物质。它与ATP形成复合物(荧光素腺苷),然后再与荧光素酶(Luciferase)结合。
目前常用的为可见光区(400-700 nm)和近红外一区(NIR-I,700-900 nm)的荧光染料。相较于可见光区和近红外一区荧光,近红外二区(NIR-II,1000-1700 nm)荧光在机体的散射和组织吸收变少,此波段的生物自荧光效应极低,在体内成像中展现出深的组织穿透深度和高的空间分辨率等。
荧光标记技术是一种非放射性的标记技术,它是通过将能发射荧光的物质共价连接或物理吸附到目标分子的某个基团上,通过检测荧光物质来实现对非荧光物质的定性和定量研究。
Cy5 hydrazide, Cy5.5 alkyne 和Cy7 NHS ester 的吸收在近红外区背景非常低,是荧光强度高、稳定的长波长染料。适合于活体小动物体内成像代替放射性元素。Cy系列的荧光染料我们一般分为磺酸化菁染料(sulfonated cyanines)和非磺酸化菁染料