溶剂的性质对荧光物质的荧光强度有明显的影响。通常荧光物质的荧光强度随着溶剂极性的增强而增大,荧光峰的波长随着溶剂介电常数增大而增大。
花菁类荧光团的优势在于近红外区域(约650-900nm)的光较难被生物分子吸收,因此可以穿透组织。该区域的自荧光也较少,这有利于体内成像。
近红外荧光花菁染料可作为荧光探针, 在生物分析中应用于核酸染色或标记, 氨基酸、 肽和蛋白质的衍生或标记等方面。
菁染料的光稳定性受自身结构和氧气等外界条件影响。具有不同母核结构的菁染料光稳定性顺序为: 吲哚>喹啉>噻唑>嗯唑。 在吲哚林菁染料中,染料的光稳定性随着共轭甲川链的增长而降低。
荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双剑的化合物。荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。
激发光谱指的是激发光的波长连续不断改变时,某一物质的荧光强度变化的曲 线。测定激发光谱时,把配好的荧光物质溶液装入石英池中,然后放入荧光光度计光路中,固定发射波长和狭缝宽度,测量显示的曲线即为荧光激发光谱。
Cy5是一种活性染料,属于常见的红色荧光团。这些多功能荧光团可以耐受3-10的pH范围,用于生物相关pH的各种应用,比如应用在荧光成像和其他基于荧光的生化分析。
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不管是肽还是蛋白,都没有颜色的,需要提前给多肽或者蛋白标记上荧光物质。比如上期提到的Cy系列菁染料、FITC、RB等。