FITC(异硫氰酸荧光素)是一种荧光素衍生物,常作为荧光探针应用于制备分子生物学或糖类聚合物的结合物分子,例如葡聚糖、透明质酸、活性基团等。FITC常用作蛋白质或多糖的不同底物的标记试剂,以及标记抗体(IgG)以及其它免疫应用。今天简要介绍下FITC标记抗体。
Dextran葡聚糖(右旋糖酐Dextran),是一类具支链葡萄糖高聚物,它不带电荷,呈电中性,易溶于水,葡聚糖跟PEG一样具有良好的生物相容性,毒性较低适用于动物体内,葡聚糖还是一种生物可降解高分子聚合物,它可降解为低分子的糖,通常常见5K/10K/20K/40K/70K/100K等不同分子量的荧光标记。
(1)荧光基团(Fluorophore):当识别基团和目标分析物相互作用时能够引起化学环境的变化。而荧光基团能将这种变化转化为仪器能够探测的信号或者是人所能感知的信号。例如:光谱变化或者颜色的改变等。
Cyanine3 tetrazine 是一种带有四嗪部分的荧光染料,用于称为 TCO(反式环辛烯)连接的偶联反应。实际上,四嗪不仅与反式环辛烯反应,而且与(甲基)环丙烯和应变的非苯并稠合环炔反应。Cyanine3 是一种中等疏水性染料,能够在非水环境以及含有一些有机助溶剂(如乙腈或 DMSO)的水介质中进行标记。对于在纯水介质中的反应,可以使用该试剂的磺化形式。
FAM(fluorescein)羧基荧光素是一种比较古老的通用荧光染料,可用于显微镜、qPCR和许多其他方法,以及基于FRET和基于荧光偏振的结合分析。
FITC的衍生物,激发波长在494nm左右,发射波长在520nm左右,发绿色荧光。
NHS-荧光素是一种荧光素染料的胺反应性衍生物,可作为其他探针的标记,用于荧光显微镜检查等。
FITC-Maleimide是一种FITC的衍生物,其激发波长在494nm左右,发射波长在520nm左右,发绿色荧光,是以马来酰亚胺(Maleimide)为原料,用FITC标记制备得到FITC-Maleimide,可直接用于点击化学反应。
FITC-Alkyne是一种FITC的衍生物,其激发波长在494nm左右,发射波长在520nm左右,发绿色荧光,是以炔烃(Alkyne)为原料,用FITC标记制备得到FITC-Alkyne,可直接用于点击化学反应。
FITC-azide是FITC衍生物,叠氮在铜催化剂的催化下容易与炔烃发生反应,也可直接用于点击化学反应。