Cyanine7-NHS ester是一种用于蛋白质标记和跟踪的荧光染料，其近红外荧光特性使其在细胞和活体成像中非常有用。以下是使用Cyanine7-NHS ester标记和跟踪蛋白质的一般步骤：
1.制备Cyanine7-NHS ester溶液：将Cyanine7-NHS ester荧光染料溶解在适当的有机溶剂中（通常是DMF或DMSO），以制备工作浓度的溶液。请注意，Cyanine7-NHS ester在有机溶剂中溶解。
2.活化蛋白质：在适当的缓冲液中，将Cyanine7-NHS ester溶液加入到要标记的蛋白质中，并轻轻混合。反应通常在室温下进行，但反应时间和条件可能会根据具体情况而变化。此步骤将使Cyanine7-NHS ester与蛋白质中的氨基基团发生反应，将荧光标记引入蛋白质中。
3.反应停止：在反应一段时间后，通常会加入氨基基团来停止反应，并确保反应完成。这有助于去除未反应的Cyanine7-NHS ester。
4.纯化：通过分离柱（如凝胶过滤柱或离心滤器）等方法，去除未反应的染料和其他杂质，以获得纯净的Cyanine7-标记蛋白质。
5.确定标记效率：使用荧光分光光度计测量Cyanine7-标记蛋白质的荧光强度，以确定标记效率和浓度。
6.蛋白质应用：将Cyanine7-标记蛋白质应用于您的实验中。这可以包括细胞培养实验、免疫荧光分析、蛋白质定位研究等。在需要时，您可以使用荧光显微镜或其他成像设备来跟踪Cyanine7-标记蛋白质的分布和定位。
7.数据分析：使用荧光成像设备和图像分析软件来分析Cyanine7-标记蛋白质的图像，研究其在细胞或组织中的行为和定位。
请根据您的具体实验需求和细胞类型来优化这些步骤。此外，要确保安全操作，遵循实验室安全规程，并选择适当的控制实验以验证标记蛋白质的功能和稳定性。
Sulfo-CY3 hydrazide
CY3 NHS ester
CY7 maleimide
ICG-Biotin
Sulfo-CY3 maleimide
5(6)-TAMRA,SE
Sulfo-CY5 alkyne
FITC-COOH
CY7 amine
FITC-Alkyne
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