CY7-NHS(N-羟基琥珀酰亚胺酯)是一种近红外荧光染料,通过NHS基团与含有氨基的分子(如蛋白质、多肽、抗体等)进行特异性结合,实现荧光标记。由于其独特的荧光特性和化学结构,CY7-NHS在生物医学研究、药物递送和荧光成像等领域具有诸多科研应用。
CY7-NHS产品特性
近红外荧光特性:CY7-NHS的激发和发射波长位于近红外区域,能够有效降低生物样本的自发荧光背景,提高成像质量。同时,近红外光对生物组织的穿透性较好,适用于深层组织的成像。
NHS基团反应性:CY7-NHS分子中的NHS基团与含有氨基的分子发生特异性反应,形成稳定的酰胺键,实现荧光标记。
高稳定性:CY7-NHS在水溶液和生理环境中具有良好的稳定性,适用于长时间的实验观察和细胞成像。
生物相容性:CY7-NHS在生物体内表现出良好的生物相容性,对细胞和组织无毒副作用。
使用:(注意:现用现溶,溶解后尽快使用。避免溶解后保存)
溶液制备:将CY7-NHS溶解在适当的有机溶剂中(如DMSO、DMF等),制备成一定浓度的溶液。注意避免长时间暴露在光照下,以防荧光性能下降。
荧光标记:将待标记的含有氨基的分子(如蛋白质、多肽、抗体等)溶解在适当的缓冲液中。按照实验需求调整CY7-NHS的浓度和反应时间。一般情况下,将CY7-NHS溶液缓慢滴加到待标记分子溶液中,并在室温下孵育一段时间。反应完成后,使用适当的缓冲液或离心等方法去除未反应的CY7-NHS和其他杂质。
成像观察:将标记好的样本置于荧光显微镜、流式细胞仪等设备下观察荧光信号。根据CY7-NHS的荧光特性选择合适的激发和发射波长,以获得清晰的荧光图像。
数据分析:对成像数据进行定性和定量分析,评估荧光标记的效果和分布情况。
注意事项
避光操作:CY7-NHS对光敏感,长时间的光照可能导致荧光强度降低。因此,在制备、使用和储存过程中应尽量避免光照。
浓度控制:过高或过低的CY7-NHS浓度都可能影响实验结果。因此,在制备溶液和进行荧光标记时,应根据实验需求和样本类型调整染料的浓度。
pH值控制:NHS基团与氨基的反应受pH值影响,一般在pH值为7-9的范围内反应。因此,在荧光标记过程中应注意调节溶液的pH值。
储存条件:CY7-NHS应储存在干燥、避光的地方,避免受潮和高温。
常见问题解答
问:如何选择合适的激发和发射波长?
答:根据CY7-NHS的荧光特性,通常选择激发波长在740-780nm之间,发射波长在760-820nm之间。具体波长可根据实验设备和样本特性进行调整。
问:CY7-NHS是否适用于所有类型的生物样本?
答:CY7-NHS适用于大多数类型的生物样本,尤其是那些含有氨基的生物分子。然而,由于不同样本的特性和结构存在差异,因此在使用前最好进行预实验验证其适用性和效果。
问:荧光标记后如何去除未反应的CY7-NHS?
答:可以通过离心、透析、凝胶过滤等方法去除未反应的CY7-NHS和其他杂质。具体方法可根据实验需求和样本类型选择。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)