一、引言
FITC(异硫氰酸荧光素)是一种诸多使用的荧光染料,它在生物学、医学和化学等多个领域被用作荧光标记试剂,如细胞成像、蛋白质标记、免疫荧光等。
二、产品概述
FITC是一种荧光素衍生物,其分子结构中的异硫氰酸基团使其能与多种生物分子(如蛋白质、多肽、核酸等)的氨基或巯基发生特异性反应,形成稳定的共价键,从而实现荧光标记。FITC在可见光下呈现黄色,而在激发光(通常为蓝光)的照射下会发出强烈的绿色荧光。
三、使用(建议现配现用,溶解后尽快使用。不要溶解后保存)
溶液配制:
溶解FITC于二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)等有机溶剂中,制备成高浓度的储备液。
根据实验需要,将储备液稀释至适当的工作浓度,并加入缓冲液或生理盐水中。
标记反应:
将待标记的生物分子(如抗体、蛋白质、细胞等)与FITC溶液混合,在适当的温度和pH值下孵育一定时间。注意控制孵育时间和温度,避免过长的孵育时间导致荧光猝灭。
纯化:
标记反应完成后,通过透析、离心或凝胶过滤等方法去除未反应的FITC和其他杂质。纯化后的标记产物可用于后续实验。
检测与分析:
使用荧光显微镜、流式细胞仪等仪器对标记产物进行检测和分析。
通过观察荧光信号的强度和分布,可以了解生物分子的表达、定位和相互作用等信息。
四、注意事项
储存条件:FITC应储存于-20℃以下的冰箱中,避免反复冻融和长时间暴露于室温下。长时间暴露于光线或高温下可能导致荧光猝灭。
稳定性:FITC溶液在储存过程中可能出现荧光减弱或猝灭现象,因此建议在制备后尽快使用。
标记条件:标记反应的条件(如孵育时间、温度、pH值等)应根据具体实验需求进行调整,以获得最佳的标记效果。
与其他物质的相互作用:FITC可能与某些物质发生非特异性反应,导致荧光信号增强或减弱。因此,在实验中应注意避免与可能干扰FITC荧光的物质接触。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)