一、引言
6-TAMRA, SE(6-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯)是一种荧光标记试剂,其基于罗丹明荧光团结构,并通过琥珀酰亚胺酯(SE)官能团与含有氨基的生物分子(如蛋白质、多肽等)进行特异性偶联。
二、产品概述
6-TAMRA, SE是一种明亮、稳定的荧光染料,其激发波长和发射波长均位于可见光区域,便于在荧光显微镜、流式细胞仪等设备上观察和检测。该试剂通过琥珀酰亚胺酯(SE)官能团与生物分子上的氨基发生特异性反应,形成稳定的酰胺键,从而实现荧光标记。由于6-TAMRA, SE具有良好的水溶性、生物相容性和低细胞毒性,因此被诸多应用于生物医学研究、药物开发等领域。
三、使用(建议现配现用,溶解后尽快使用。不要溶解后保存)
溶解与制备
将6-TAMRA, SE粉末溶解于适当的溶剂中(如DMSO、DMF等),制备成所需浓度的溶液。
注意在溶解过程中避免剧烈搅拌或震荡,以防荧光猝灭。
标记反应
将待标记的生物分子(如蛋白质、多肽等)与6-TAMRA, SE溶液混合,并调整反应体系的pH值至适合琥珀酰亚胺酯反应的范围内。
在适当的温度和时间条件下进行反应,确保标记反应的充分进行。
纯化
反应完成后,通过透析、凝胶过滤或离心等方法去除未反应的6-TAMRA, SE和其他杂质,得到纯化的标记产物。
检测与分析
使用荧光光谱仪、荧光显微镜等设备对标记产物进行检测和分析。
通过比较不同条件下荧光信号的强度和变化,了解生物分子的表达、定位和相互作用等信息。
四、储存条件
将6-TAMRA, SE应储存于-20℃以下的冰箱中,避免反复冻融和长时间暴露于室温下。长时间暴露于空气中或高温环境可能导致荧光减弱或猝灭。对于已溶解的6-TAMRA, SE溶液,建议在制备后尽快使用,并避免反复冻融。
五、注意事项
在使用过程中,避免长时间接触和吸入6-TAMRA, SE粉末或溶液。在操作时佩戴手套和防护眼镜等防护设备。
注意调整反应体系的pH值至适合琥珀酰亚胺酯反应的范围内,以确保标记反应的充分进行。
对于已溶解的6-TAMRA, SE溶液,建议在使用前进行充分摇匀,以确保其浓度均匀一致。
如需长期保存6-TAMRA, SE粉末或溶液,请将其储存于-20℃的冰箱中,并避免反复冻融。
六、常见问题解答
问:为什么标记后的荧光信号较弱?
答:可能是由于标记反应条件不当(如pH值、温度、时间等)或纯化过程中损失过多荧光分子所致。请检查并优化标记反应条件,并确保纯化步骤的正确性。
问:如何避免荧光猝灭?
答:避免在溶解和标记过程中剧烈搅拌或震荡,以防荧光猝灭。同时,注意储存条件并避免长时间暴露于空气中或高温环境。
问:如何确定标记反应的充分进行?
答:可以通过比较标记前后的荧光信号强度来判断标记反应的充分进行。如果荧光信号强度显著增加,则说明标记反应较为成功。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)