一、引言
DSPE-CY5.5是一种将磷脂DSPE(1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺)与近红外荧光染料CY5.5结合的荧光探针。该探针利用DSPE的膜融合性和CY5.5的强荧光特性,在生物医学研究中被科研应用于细胞膜标记、药物递送、细胞成像等领域。
二、DSPE-CY5.5产品特性
膜融合性:DSPE是细胞膜的主要成分之一,因此DSPE-CY5.5能够轻易地与细胞膜融合,为细胞膜标记和药物递送提供便利。
强荧光特性:CY5.5是一种具有荧光性能的染料,其激发波长和发射波长位于近红外区域,能有效降低生物样本的自发荧光背景,提高成像质量。
稳定性:DSPE-CY5.5在水溶液和生理环境中具有良好的稳定性,适用于长时间的实验观察和细胞成像。
生物相容性:由于DSPE是细胞膜的天然成分,DSPE-CY5.5在生物体内表现出良好的生物相容性,对细胞无毒副作用。
三、使用:(注意:建议现配现用,溶解后尽快使用。)
溶液制备:将DSPE-CY5.5溶解在适当的有机溶剂中(如氯仿、甲醇等),制备成一定浓度的溶液。注意避免长时间暴露在光照下,以防荧光性能下降。
细胞标记:将细胞与DSPE-CY5.5溶液混合,根据实验需求调整染料浓度和孵育时间。通常,在适当的温度和pH条件下孵育一段时间,使DSPE-CY5.5充分与细胞膜融合。
清洗与成像:孵育完成后,使用适当的缓冲液清洗细胞,去除未结合的DSPE-CY5.5。然后,使用荧光显微镜、流式细胞仪等设备对细胞进行成像和分析。
四、注意事项
避光操作:DSPE-CY5.5对光敏感,长时间的光照可能导致荧光性能下降。因此,在制备、使用和储存过程中应尽量避免光照。
浓度控制:过高或过低的DSPE-CY5.5浓度都可能影响实验结果。因此,在制备溶液和进行细胞标记时,应根据实验需求和细胞类型调整染料浓度。
清洗步骤:确保清洗步骤充分彻底,以去除未结合的DSPE-CY5.5,避免背景荧光的干扰。
储存条件:DSPE-CY5.5-20℃以下的冰箱中,避免反复冻融和长时间暴露于室温下。
五、常见问题解答
问:如何选择合适的荧光显微镜参数进行成像?
答:根据DSPE-CY5.5的荧光特性,选择合适的激发波长和发射波长进行成像。通常,激发波长在650-670nm之间,发射波长在670-710nm之间。此外,根据实验需求和细胞类型调整显微镜的放大倍数、曝光时间等参数。
问:DSPE-CY5.5是否适用于所有类型的细胞?
答:DSPE-CY5.5适用于大多数类型的细胞,但由于不同细胞的细胞膜成分和性质存在差异,因此在使用前最好进行预实验验证其适用性和效果。
问:DSPE-CY5.5是否会对细胞产生毒性?
答:DSPE-CY5.5在生物体内表现出良好的生物相容性,对细胞无毒副作用。然而,在长时间或高浓度使用时,仍需注意其对细胞可能产生的影响。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)