一、引言
5-FAM Maleimide（5-羧基荧光素马来酰亚胺）是一种常用的荧光标记试剂，它结合了荧光素的高荧光量子产率和马来酰亚胺的特异性反应活性。该试剂可用于生物分子的特异性标记，如蛋白质、多肽等，为生物医学研究、药物发现和生物成像等领域提供了科研工具。
二、产品概述
5-FAM Maleimide是一种明亮的绿色荧光染料，其激发波长和发射波长分别位于可见光区域。该试剂通过马来酰亚胺官能团与含有巯基（-SH）的生物分子进行特异性反应，形成稳定的硫醚键，从而实现荧光标记。由于5-FAM Maleimide具有良好的水溶性、生物相容性和低细胞毒性，因此在生物医学研究中得到了诸多应用。
三、使用（建议现配现用，溶解后尽快使用。不要溶解后保存）
溶解与制备
将5-FAM Maleimide粉末溶解于适当的溶剂中，如DMSO、DMF或去离子水等。注意在溶解过程中避免剧烈搅拌或震荡，以防荧光猝灭。
根据实验需求，制备成所需浓度的5-FAM Maleimide溶液。
标记反应
将待标记的生物分子（如蛋白质、多肽等）与5-FAM Maleimide溶液混合，并调整反应体系的pH值至适合马来酰亚胺反应的范围内（通常为6.5-7.5）。
纯化
反应完成后，通过透析、凝胶过滤或离心等方法去除未反应的5-FAM Maleimide和其他杂质，得到纯化的标记产物。
检测与分析
使用荧光光谱仪、荧光显微镜等设备对标记产物进行检测和分析。通过比较不同条件下荧光信号的强度和变化，了解生物分子的表达、定位和相互作用等信息。
四、储存条件
将5-FAM Maleimide粉末应储存于-20℃以下的冰箱中，避免反复冻融和长时间暴露于室温下。长时间暴露于空气中或高温环境可能导致荧光减弱或猝灭。对于已溶解的5-FAM Maleimide溶液，建议在制备后尽快使用，并避免反复冻融。
五、注意事项
安全性：在使用过程中，避免长时间接触和吸入5-FAM Maleimide粉末或溶液。在操作时佩戴手套和防护眼镜等防护设备。
反应条件：注意调整反应体系的pH值至适合马来酰亚胺反应的范围内，以确保标记反应的充分进行。
纯化步骤：纯化过程中应注意避免荧光猝灭，确保纯化步骤的正确性。
储存条件：已溶解的5-FAM Maleimide溶液应尽快使用，避免长时间储存导致荧光减弱或失效。
六、常见问题解答
问：为什么标记后的荧光信号较弱？
答：可能是由于标记反应条件不当（如pH值、温度、时间等）或纯化过程中损失过多荧光分子所致。请检查并优化标记反应条件，并确保纯化步骤的正确性。
问：如何避免荧光猝灭？
答：避免在溶解和标记过程中剧烈搅拌或震荡，以防荧光猝灭。同时，注意储存条件并避免长时间暴露于空气中或高温环境。
问：如何确定标记反应的充分进行？
答：可以通过比较标记前后的荧光信号强度来判断标记反应的充分进行。如果荧光信号强度增加，则说明标记反应较为成功。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
