在细胞生物学研究中,脂质的代谢和分布对于理解细胞功能以及药物开发等方面具有意义。BODIPY 493/503作为一种绿色荧光染料,以其对细胞内中性脂质的特异性染色能力和光学性能,在胞内脂粒染色中得到了诸多应用。
BODIPY 493/503的基本特性
BODIPY 493/503是一种具有强紫外吸收能力的小分子染料,其荧光峰尖锐,量子产率高。该染料对环境的极性和pH值变化相对不敏感,因此在不同生理条件下能保持稳定的荧光性能。由于其结构的非对称性,BODIPY 493/503能够很好地穿过细胞膜进入细胞内部,并在细胞内的中性脂类上定位,进行特异性染色。
胞内脂粒染色的原理
胞内脂粒染色主要基于荧光染料的特异性结合和荧光成像技术。BODIPY 493/503作为一种亲脂性荧光探针,能够特异性地结合到细胞内的中性脂质上,如脂滴。在特定波长光的激发下,这些结合的染料会发出明亮的绿色荧光,从而实现对胞内脂粒的可视化观察。
应用方法
实验准备
试剂准备:BODIPY 493/503染料工作液(根据实验需求调整浓度)、PBS缓冲液、无血清细胞培养基等。
细胞准备:选取适当的细胞系进行培养,并在实验前进行必要的处理(如饥饿处理以促进脂滴形成)。
染色步骤
细胞固定(可选):对于固定细胞,可使用适当的固定剂(如4%甲醛)对细胞进行固定处理。对于活细胞,则跳过此步骤。
洗涤:用PBS缓冲液洗涤细胞两次,每次5分钟,以去除残留的培养基或固定剂。
染色:加入适量的BODIPY 493/503染料工作液,覆盖细胞表面,并在室温下孵育一定时间(通常为5-30分钟)。孵育时间的长短可根据实验需求和细胞类型进行调整。
洗涤:再次用PBS缓冲液洗涤细胞,以去除未结合的染料。
观察:使用荧光显微镜或流式细胞术等仪器观察胞内脂粒的荧光信号。
应用优势
特异性高:BODIPY 493/503能够特异性地结合到细胞内的中性脂质上,减少非特异性染色,提高染色结果的准确性。
灵敏度高:该染料具有较高的荧光量子产率和消光系数,能够在较低的浓度下实现荧光标记和成像。
稳定性好:BODIPY 493/503对环境的极性和pH值变化相对不敏感,在不同生理条件下能保持稳定的荧光性能。
兼容性强:该染料与多种显微镜技术(如共聚焦显微镜、双光子显微镜)和流式细胞术兼容,适用于多种实验需求。
BODIPY 493/503作为一种绿色荧光染料,在胞内脂粒染色中表现。其特异性高、灵敏度高、稳定性好以及兼容性强等优势使得该染料成为细胞生物学研究中的工具。通过应用BODIPY 493/503进行胞内脂粒染色,研究人员可准确地观察和分析细胞内脂质的代谢和分布情况,为深入理解细胞功能、药物开发提供支持。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)