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CY5.5 NH2在荧光染色与组织染色中的应用

时间:2024-08-15    阅读:508    点赞:0

CY5.5 NH2,作为一种经过特殊修饰的近红外荧光染料,不仅继承了CY5.5系列染料在近红外区域的荧光性能,还通过引入氨基(NH2)基团,增强了其在生物分子标记和组织染色中的灵活性和应用潜力。

 

CY5.5 NH2的荧光特性

CY5.5 NH2染料的核心结构基于Cyanine 5.5,这是一种常用的近红外荧光染料,其最大激发波长和发射波长分别位于650-670nm和670-690nm之间。这一特性使得CY5.5 NH2在生物组织中的穿透深度更深,背景荧光更低,从而提高了成像的信噪比。此外,氨基基团的引入不仅为染料提供了更多的化学修饰位点,还增强了染料与生物分子之间的相互作用能力,为多样化的标记策略提供了可能。

Cy5.5 NH2 

荧光染色应用

细胞标记:CY5.5 NH2可直接或通过偶联反应与含有羧基、醛基等官能团的生物分子(如抗体、肽类、核酸等)结合,形成稳定的荧光标记物。这些标记物能够特异性地识别并结合到目标细胞上,通过荧光显微镜观察,可以清晰地显示细胞的位置、形态及分布。

蛋白质追踪:在蛋白质组学和细胞生物学研究中,CY5.5 NH2可用于标记特定的蛋白质,追踪其在细胞内的定位、转运及相互作用过程。这种实时、动态的监测方式有助于揭示蛋白质的功能机制和调控网络。

组织染色应用:CY5.5 NH2可用于标记标志物等关键生物分子,通过荧光成像技术辅助进行诊断。

组织工程:CY5.5 NH2可用于标记移植细胞或组织,监测其在受体中的存活、迁移及功能恢复情况。

 

实验方法

标记策略

根据实验需求,CY5.5 NH2可通过直接标记或间接标记的方式与目标生物分子结合。直接标记适用于含有氨基、巯基等活性基团的生物分子;间接标记则通常涉及中间连接分子的引入,如通过生物素-亲和素系统或点击化学反应实现标记。

 

染色步骤

样品准备:根据实验对象(如细胞、组织切片等)进行适当的前处理,如固定、脱水、通透等。

标记反应:将CY5.5 NH2或其标记物与样品混合,在适宜条件下进行反应,确保标记物与目标生物分子充分结合。

清洗与封片:去除未结合的染料和杂质,使用适当的封片剂对样品进行封片处理。

荧光成像:使用荧光显微镜或共聚焦显微镜对样品进行成像观察,记录并分析实验结果。


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