一、引言
Avidin-FITC是一种结合了链霉亲和素(Avidin)和荧光素异硫氰酸酯(FITC)的生物探针。它利用Avidin与生物素之间的高度亲和力,与生物素标记的生物分子特异性结合,并通过FITC产生的绿色荧光信号进行可视化。
二、产品特性
高亲和力:Avidin与生物素之间的结合力极强,能够确保Avidin-FITC与目标生物分子特异地结合。
强烈荧光信号:FITC染料赋予Avidin-FITC强烈的绿色荧光信号,便于在荧光显微镜下进行观察和检测。
生物相容性好:Avidin-FITC由天然蛋白质和荧光染料组成,具有良好的生物相容性,对细胞和组织无毒性。
三、使用(建议现配现用,溶解后尽快使用。不要溶解后保存)
样品准备:首先,确保实验所需的细胞、组织样本或生物分子已经通过生物素标记。这可以通过使用生物素化的抗体、核酸探针或其他生物分子实现。
Avidin-FITC稀释:根据实验需求,将Avidin-FITC稀释至适当的浓度。注意,过高的浓度可能会导致非特异性结合和背景荧光增加。
孵育:将稀释后的Avidin-FITC与样品混合,在适当的温度和时间下进行孵育。具体的孵育条件(如温度、时间)应根据实验的具体要求和样品的性质来确定。
清洗:孵育结束后,使用适当的清洗液(如PBS)对样品进行清洗,以去除未结合的Avidin-FITC和其他杂质。
观察与分析:将清洗后的样品置于荧光显微镜下观察,分析Avidin-FITC与目标生物分子的结合情况。根据需要,可以使用流式细胞仪等设备进行定量分析。
四、注意事项
避光保存:应储存于-20℃以下的冰箱中,避免反复冻融和长时间暴露于室温下。
避免反复冻融:反复冻融可能导致Avidin-FITC的活性降低或失效,因此应尽量避免。
注意稀释比例:Avidin-FITC的稀释比例应根据实验需求和样品的性质来确定,以确保最佳的荧光信号和特异性。
选择合适的清洗液:清洗液的选择应根据实验的具体要求和样品的性质来确定,以确保充分去除未结合的Avidin-FITC和其他杂质。
五、常见问题解答
问:如何判断Avidin-FITC是否已与目标生物分子结合?
答:通过观察荧光显微镜下的绿色荧光信号,可以判断Avidin-FITC是否已与目标生物分子结合。如果观察到明显的绿色荧光信号,则说明Avidin-FITC已成功结合到目标生物分子上。
问:如何减少非特异性结合和背景荧光?
答:首先,确保使用适当的稀释比例和孵育条件。其次,在清洗步骤中,使用适当的清洗液彻底去除未结合的Avidin-FITC和其他杂质。最后,在观察和分析时,注意调整荧光显微镜的参数以减少背景荧光的干扰。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)