近红外荧光染料因其优势,如低背景荧光、深组织穿透能力和低光毒性,成为研究者们的选择之一。CY5.5 NHS(Cyanine 5.5 NHS Ester),以其标记效率和稳定的荧光性能,在众多近红外荧光染料中应用,成为生物标记和成像领域的成员。
结构特点
CY5.5 NHS是一种基于Cyanine(花青素)系列的近红外荧光染料,其分子结构中包含了磺化基团和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活性酯。磺化基团不仅增强了染料的水溶性,还提高了其在生物体系中的稳定性;而NHS活性酯则能与生物分子中的氨基(如蛋白质、抗体、肽类等的伯胺或仲胺)发生酰胺化反应,形成稳定的共价键,从而实现目标分子的荧光标记。
应用领域
生物成像:CY5.5 NHS因其近红外荧光特性,被广泛应用于细胞成像、组织成像及活体动物成像中。通过标记特定的生物分子(如抗体、蛋白质、核酸等),研究者可以实时追踪这些分子在生物体内的分布、动态变化及相互作用。
药物研发:CY5.5 NHS可用于标记药物分子或药物载体,以评估药物的靶向性、生物分布及药代动力学特性。通过荧光成像技术,研究者可以直观地观察到药物分子在体内的分布情况和作用效果,为药物的优化和筛选提供科研支持。
分子生物学研究:CY5.5 NHS也被用于标记DNA、RNA等核酸分子,以研究其结构、功能及相互作用。通过荧光标记技术,研究者可以实现对核酸分子的高灵敏度检测、定量分析及可视化观察。
使用方法
准备工作
确认目标生物分子:确保已准备好需要标记的生物分子,并确保其含有可用于反应的氨基基团。
计算所需量:根据实验需求和CY5.5 NHS的摩尔消光系数,计算出所需的标记量。
溶解CY5.5 NHS:使用适当的有机溶剂(如DMSO、DMF等)溶解CY5.5 NHS,制备成一定浓度的溶液。注意避免使用水或含有氨基的溶剂。
标记反应
调整pH值:将目标生物分子溶液调整至适宜的pH值(通常为7.2-8.5),以促进酰胺化反应的进行。
混合反应物:将溶解好的CY5.5 NHS溶液逐滴加入到目标生物分子溶液中,边加边轻轻搅拌,确保反应均匀进行。
控制反应条件:根据实验需要,设定合适的反应温度和时间。通常,室温下反应数小时至过夜即可获得满意的标记效果。
纯化与验证
纯化标记产物:使用适当的纯化方法(如透析、凝胶过滤、离心等)去除未反应的CY5.5 NHS和其他杂质。
验证标记效果:通过光谱分析(如紫外-可见吸收光谱、荧光光谱)、SDS-PAGE电泳或质谱等方法验证标记产物的纯度和荧光特性。
CY5.5 NHS作为一种近红外荧光标记试剂,在生物医学研究和生物成像技术中发挥着作用。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)