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Cyanine7 NHS Ester在细胞示踪中的应用

时间:2024-08-16    阅读:223    点赞:0

在众多荧光标记染料中,Cyanine7(Cy7)NHS Ester因其近红外荧光特性和生物标记能力,在细胞示踪领域得到了诸多科研应用。

 

Cyanine7 NHS Ester的结构特点

Cyanine7(Cy7)是一种近红外荧光染料,其分子结构基于花青素骨架,通过修饰和优化获得了更高的荧光量子产率和光稳定性。Cy7 NHS Ester则是在Cy7荧光团上引入了N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯官能团,这一设计使得Cy7 NHS Ester能够特异性地与生物分子中的氨基发生反应,实现荧光标记。Cy7 NHS Ester的最大激发波长通常在740-780nm之间,最大发射波长则位于780-820nm的近红外区域,这一特性使其能够穿透较深的生物组织,减少背景荧光干扰,提高成像的信噪比和深度穿透能力。

CY7-NHS 

细胞示踪原理

细胞示踪技术主要依赖于荧光标记染料对目标细胞的特异性标记和随后的追踪观察。Cy7 NHS Ester作为细胞示踪的荧光标记物,其工作原理如下:首先,将Cy7 NHS Ester与含有氨基的细胞表面受体、抗体、肽类或蛋白质等生物分子结合,形成稳定的荧光标记复合物;然后,通过孵育等方式将荧光标记复合物引入目标细胞中;最后,利用近红外荧光显微镜、流式细胞仪等设备进行荧光成像,实时监测目标细胞在体内的分布、迁移及行为变化。

 

实验方法

荧光标记复合物的制备:将Cy7 NHS Ester溶解于适当的有机溶剂中,制备成一定浓度的溶液。随后,将含有氨基的目标生物分子(如抗体、肽类等)与Cy7 NHS Ester溶液按一定比例混合,在适宜的反应条件下进行孵育,使Cy7 NHS Ester与生物分子发生酰胺化反应,形成荧光标记复合物。

细胞培养与标记:将待追踪的细胞培养至适当密度后,加入荧光标记复合物进行孵育。根据实验需要调整孵育时间、温度及浓度等条件,以确保荧光标记复合物能够有效地进入细胞内并与目标分子结合。

细胞示踪与成像:完成细胞标记后,利用近红外荧光显微镜、流式细胞仪等设备进行荧光成像。通过调整成像参数(如曝光时间、增益等),获得清晰、稳定的荧光图像。对图像进行分析处理,可以获取目标细胞在体内的分布、迁移及行为变化等信息。

 

Cy7 NHS Ester在细胞示踪领域的应用:

高灵敏度与特异性:Cy7 NHS Ester能够高效、特异性地与生物分子结合,实现目标细胞的精准标记和追踪。

低背景荧光干扰:Cy7的近红外发射波长能够穿透较深的生物组织,减少背景荧光干扰,提高成像的信噪比和分辨率。

长时间监测:Cy7荧光团的光稳定性好,能够在较长时间内保持荧光强度稳定,适用于长时间细胞示踪实验。

多领域应用Cy7 NHS Ester在免疫学研究、干细胞治疗及药物开发等领域具有诸多应用前景。

 

Cy7 NHS Ester作为一种近红外荧光标记染料,在细胞示踪领域展现出科研性能和应用价值。通过合理的实验设计和操作,科研人员可以充分利用Cy7 NHS Ester进行细胞示踪实验,为科学研究的深入发展提供数据支持。

 

【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)

标签: Cyanine菁染料 NHS
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