Cyanine 7 (Cy7) NHS Ester,作为一种近红外荧光标记试剂,在生物医学研究、药物研发及生物成像等领域中扮演着科研角色。其独特的近红外发射波长(通常在700-750nm之间),使得Cy7 NHS Ester能够穿透较深的生物组织,减少背景荧光干扰,提供高信噪比的成像效果。
荧光特性:Cy7 NHS Ester在约650-670nm的激发光下,能够发出强烈的近红外荧光,其发射峰通常位于700-750nm。这一特性使得它在生物体内成像时能够有效避开血液、水和其他组织的自发荧光,提高成像的清晰度和灵敏度。
化学反应性:NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)基团作为活性酯,能够与生物分子中的氨基(如蛋白质、抗体、肽类等的伯胺或仲胺)发生高效的酰胺化反应,形成稳定的共价键。
储存条件:Cy7 NHS Ester应储存在干燥、避光、低温(通常是-20℃以下的冰箱中,避免反复冻融和长时间暴露于室温下)的条件下,以防止其因光照、湿度或温度波动而导致的降解或性能下降。开封后,建议尽快使用,并尽量减少暴露在空气中的时间,以保持其活性。
使用步骤
准备工作
确认目标生物分子:确保你已准备好需要标记的生物分子(如抗体、蛋白质、肽类等),并确保其含有可用于反应的氨基基团。
计算所需量:根据实验需求和Cy7 NHS Ester的摩尔消光系数,计算出所需的标记量。
溶解Cy7 NHS Ester:使用适当的有机溶剂(如DMSO、DMF等)溶解Cy7 NHS Ester,制备成一定浓度的溶液。
标记反应
调整pH值:将目标生物分子溶液调整至适宜的pH值(通常为7.2-8.5),以促进酰胺化反应的进行。
混合反应物:将溶解好的Cy7 NHS Ester溶液逐滴加入到目标生物分子溶液中,边加边轻轻搅拌,确保反应均匀进行。
控制反应条件:根据实验需要,设定合适的反应温度和时间。通常,室温下反应数小时至过夜即可获得满意的标记效果。
终止反应:通过添加适量的缓冲液或稀释剂来终止反应,并准备进行后续的纯化步骤。
纯化与验证
纯化标记产物:使用适当的纯化方法(如透析、凝胶过滤、离心等)去除未反应的Cy7 NHS Ester和其他杂质。
验证标记效果:通过光谱分析(如紫外-可见吸收光谱、荧光光谱)、SDS-PAGE电泳或质谱等方法验证标记产物的纯度和荧光特性。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)