Cy5-Biotin(花青素Cy5-生物素)作为一种灵敏的生物标记物,应用于细胞成像、蛋白质检测和生物分子相互作用研究中。
Cy5-Biotin概述
Cy5-Biotin是由Cyanine 5(Cy5)荧光染料和Biotin(生物素)结合而成的一种复合物。Cy5是一种近红外荧光染料,具有较高的荧光量子产率和较长波长的发射光谱,其激发和发射波长通常在640/660 nm附近。生物素是一种小分子有机化合物,在生物学研究中常作为标记物使用。两者结合后形成的Cy5-Biotin不仅保留了Cy5的荧光特性,还具备了生物素的高亲和性,使其在细胞标记和追踪中具有独特优势。
分子结构与性质
Cy5-Biotin的分子式通常为C44H59ClN6O3S(不同来源可能略有差异),分子量约为787.5。该复合物具有良好的水溶性和高消光系数,外观为蓝色固体。Cy5-Biotin的高灵敏度、稳定性和特异性使其成为细胞表面标记和追踪的工具。
Cy5-Biotin在细胞表面标记中的应用
标记原理:Cy5-Biotin通过其生物素部分与细胞表面的特定分子(如蛋白质、抗体或多肽)结合,进而实现细胞的荧光标记。Cy5的荧光特性使得标记后的细胞在显微镜下易于观察和追踪。此外,Cy5-Biotin还可以通过与亲和素或链霉亲和素结合,进一步增强标记的稳定性和灵敏度。
标记步骤
1.目标分子选择:首先确定需要标记的细胞表面分子,如受体、抗原或其他蛋白质。
2.抗体或配体标记:将Cy5-Biotin与特异性抗体或配体结合,形成Cy5-Biotin标记的探针。
3.细胞孵育:将标记探针与细胞孵育,使探针通过抗原-抗体反应或配体-受体相互作用结合到细胞表面。
4.洗涤与成像:去除未结合的探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪对标记细胞进行成像和定量分析。
Cy5-Biotin在细胞追踪中的应用
Cy5-Biotin标记的细胞不仅可以在静态条件下进行观察,还可以在动态过程中进行追踪。例如,在细胞迁移、分化、增殖等生物学过程中,Cy5-Biotin标记的细胞可以实时显示其位置变化,为研究细胞行为提供直观的证据。
此外,Cy5-Biotin还可用于活体成像研究。由于其近红外荧光特性,Cy5-Biotin能够穿透深层组织,提供高对比度的图像,使得在动物模型中对特定细胞进行长时间追踪成为可能。
Cy5-Biotin标记的蛋白质可以通过与亲和素或链霉亲和素结合,用于研究蛋白质-蛋白质相互作用。这种技术不仅提高了检测的灵敏度,还简化了实验步骤,促进了蛋白质相互作用网络的研究。
Cy5-Biotin作为一种灵敏的生物标记物,在细胞表面标记和追踪领域具有科研应用前景。其独特的荧光特性和高亲和性使得它在细胞成像、蛋白质检测和生物分子相互作用研究中发挥作用。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)