水溶性CY5-NHS Ester（Sulfo-Cyanine5 N-Hydroxysuccinimide Ester），作为一种荧光标记试剂，在生物医学和生命科学领域发挥着作用。其独特的化学结构赋予了它良好的水溶性和生物相容性，使其在细胞染色、蛋白质标记等方面具有诸多应用前景。
化学结构与特性
水溶性CY5-NHS Ester的化学结构中包含一个磺酸盐基团和一个NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯活性基团。磺酸盐基团的存在使得该染料在水中具有良好的溶解性，而NHS酯活性基团则能与蛋白质、抗体等生物分子中的氨基（-NH2）基团发生共价酰胺化反应，从而实现荧光标记。此外，该染料的激发波长为646 nm，发射波长为664-670 nm，属于近红外区域，这一特性使其在生物样品成像中具有较好的光学穿透深度和减少背景干扰的能力。
细胞染色应用
免疫荧光染色：水溶性CY5-NHS Ester可以用于将荧光标记引入抗体或其他免疫分子中，实现对特定蛋白质的定性和定量检测。通过将抗体与CY5-NHS Ester结合，可以特异性地标记目标蛋白质，进而在荧光显微镜下观察其在细胞内的分布和表达情况。
细胞成像：将水溶性CY5-NHS Ester标记在细胞内的蛋白质上，可以进行细胞成像研究，观察蛋白质的定位、分布和动态变化。近红外区域的荧光发射使得该染料在较深的组织深度也能进行有效成像，且不受生物组织自发荧光和散射的干扰。因此，它特别适用于复杂生物样本的成像分析。
蛋白质相互作用研究：通过将水溶性CY5-NHS Ester分别标记在两个相互作用的蛋白质上，可以实现蛋白质相互作用的荧光共定位和荧光共分析。这种方法不仅可以帮助研究者揭示蛋白质间的相互作用网络，还能进一步探究蛋白质复合物的形成机制和功能特性。
荧光定量PCR及其他生物分析：除了直接用于蛋白质标记外，水溶性CY5-NHS Ester还可以间接用于核酸等生物大分子的标记。例如，在荧光定量PCR中，通过标记引物或探针，可以实现目标核酸的高灵敏度检测。此外，该染料还可用于流式细胞术、免疫组化等多种实验技术中，为生物学研究提供多样化的分析手段。
使用（建议现配现用，溶解后尽快使用。不要溶解后保存）
准备水溶性CY5-NHS Ester：将适量的水溶性CY5-NHS Ester溶解于DMSO或DMF等有机溶剂中，配置成所需浓度的溶液。
准备待标记样品：将待标记的细胞或蛋白质溶解在适当的缓冲液中，确保样品的纯度和浓度。
标记反应：将水溶性CY5-NHS Ester溶液滴加到含有氨基基团的生物分子溶液中，在适当的pH值和温度下进行共价反应。反应时间通常为几十分钟至数小时。
停止反应：使用适当的缓冲液或化学试剂停止反应，防止继续标记。
纯化：对标记后的样品进行纯化，去除未反应的水溶性CY5-NHS Ester和其他副产物。
检测：使用荧光光谱仪或其他荧光成像设备检测标记后的样品，确认标记效果和荧光强度。
注意事项
水溶性CY5-NHS Ester对强光照射和热源较为敏感，因此在使用过程中应避免过度光照和高温。
建议将水溶性CY5-NHS Ester密封保存于-20°C冰箱中，以确保其稳定性和长期保存的可行性。
取用前缓慢恢复至室温，取用后立即充入惰性气体，并重新冷冻保存，以减少氧化和降解的风险。
在进行标记反应时，应严格控制反应条件，如pH值、温度和时间等，以获得合适标记效果。
水溶性CY5-NHS Ester作为一种性能优异、应用诸多的荧光标记试剂，在细胞染色与蛋白质标记中展现出诸多潜力。其良好的水溶性、生物相容性和光稳定性使得它成为生物学研究中工具之一。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
