Cy7.5 NHS Ester(Cyanine 7.5 N-羟基琥珀酰亚胺酯)作为一种近红外荧光染料,在生物医学研究中发挥着作用。该荧光探针以其强烈的荧光信号、光化学稳定性和良好的生物相容性,成为了细胞成像、蛋白质标记和药物追踪等领域的选择。
Cy7.5 NHS Ester的性质
化学结构:Cy7.5 NHS Ester是由Cy7.5与磺化基团共轭偶联形成的一种活性脂质,具有近红外荧光特性。其化学结构使得该染料在保持优良亲水性和亲脂性的同时,能够稳定地镶嵌在细胞膜上,有效进入细胞内并发挥其生物活性作用。
光学特性:Cy7.5 NHS Ester具有较低的细胞毒性、良好的光稳定性以及组织穿透能力。其激发波长通常在788nm左右,这使得该染料在近红外区域具有较强的荧光量子产率和较长的激发与发射波长,有助于减少生物样品自发荧光的干扰,提高检测灵敏度。
物理性质:Cy7.5 NHS Ester通常呈粉末状,分子量为782.41,溶于有机溶剂如DMSO、DMF和二氯甲烷,但几乎不溶于水。此外,该染料在干燥、无水的条件下操作效果最佳,且需与pH值在7.0-8.5之间的缓冲液反应,以保证其荧光强度和稳定性。
应用领域
细胞成像:Cy7.5 NHS Ester在细胞成像中的应用诸多。通过与细胞内的蛋白质、多肽或其他生物大分子发生共价连接,实现细胞标记和追踪。例如,通过导入Cy7.5 NHS Ester标记的探针,可以对细胞进行定量和定性的成像,追踪特定蛋白质或分子的分布和动态变化。此外,结合适当的探针如钙指示剂、pH指示剂等,还可以用于细胞功能研究,监测细胞内离子浓度、酸碱度等生理参数的变化。
蛋白质标记与检测:Cy7.5 NHS Ester能够与氨基基团反应,形成共价键结合在分子中,从而稳定地标记蛋白质、抗体、寡核苷酸等生物大分子。这种标记技术应用于蛋白质分析、流式细胞术等领域,提高了检测的特异性和灵敏度。
药物载体与追踪:由于其良好的水溶性和低毒性,Cy7.5 NHS Ester还可以作为药物载体,将药物分子有效地输送到目标细胞内。同时,通过荧光标记技术,可以实时追踪药物在体内的分布和代谢情况,为药物研发和优化提供信息。
实验使用(建议现配现用,溶解后尽快使用。不要溶解后保存)
溶解与混合:按照所需浓度将Cy7.5 NHS Ester溶解在缓冲液中,并加入适当抗体,混合均匀。
细胞处理:将细胞裂解液加入细胞中,冰上放置30分钟,期间轻轻摇动几次。
洗涤与标记:用细胞裂解液洗涤细胞,去除未结合的抗体和蛋白质。然后用含有Cy7.5 NHS Ester的抗体溶液洗涤细胞,轻轻摇动,冰上放置30分钟。
荧光检测:用缓冲液洗涤细胞,去除未结合的抗体和蛋白质。离心细胞,收集上清液进行荧光检测或流式细胞仪分析。
注意事项
在操作过程中需避免污染和交叉污染,以免影响实验结果。
应储存于-20℃以下的冰箱中,避免反复冻融和长时间暴露于室温下。
Cy7.5 NHS Ester作为一种近红外荧光探针,在生物医学研究展现出了科研潜力。其光学特性、物理性质和应用领域使其成为科学家和研究人员的工具。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)