Sulfo-CY5 NHS Ester作为一种荧光标记试剂,因其水溶性、高荧光强度和良好的生物相容性,被应用于细胞内结构的标记。
Sulfo-CY5 NHS Ester,全称Sulfo-Cyanine5 NHS ester,是一种含有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯基团的红色荧光染料。该染料在近红外区域(约650nm)具有强吸收和发射特性,适用于荧光显微镜成像。其结构中的NHS酯基团能够与蛋白质、多肽等生物分子的氨基发生共价结合,从而实现对目标分子的标记。
Sulfo-CY5 NHS Ester的优势
良好的水溶性:Sulfo-CY5 NHS Ester在水中具有良好的溶解性,便于在生理条件下进行标记反应,减少了有机溶剂对细胞活性的影响。
高荧光强度:该染料在近红外区域具有高强度荧光信号,有助于在复杂生物环境中进行高灵敏度检测。
低细胞毒性:由于其分子结构稳定且生物相容性好,Sulfo-CY5 NHS Ester对细胞的毒性较低,适合用于长时间细胞成像实验。
组织穿透力强:近红外荧光波长较长,能够穿透较厚的生物组织,适用于体内成像和深层组织成像。
使用:(建议现配现用,溶解后尽快使用。不要溶解后保存)
试剂准备
将低温保存的Sulfo-CY5 NHS Ester置于室温下回温,然后用高品质无水DMSO溶解至适当浓度。
准备待标记的目标分子(如蛋白质、多肽等),同样进行回温和溶解处理。
标记反应
将溶解好的Sulfo-CY5 NHS Ester溶液与待标记的目标分子溶液按一定比例混合,加入适量的催化剂,常温避光搅拌反应过夜。
反应结束后,通过适当的纯化方法(如HPLC)去除未反应的染料和杂质,得到纯净的标记产物。
细胞内标记:
将纯化后的标记产物添加到细胞培养液中,与细胞共孵育一定时间,使标记物进入细胞并与目标结构结合。
使用荧光显微镜观察细胞内的荧光信号,分析目标结构的定位、分布和动态变化。
应用实例
细胞成像与定位研究:Sulfo-CY5 NHS Ester可用于标记细胞内的特定蛋白质、核酸等生物分子,通过荧光显微镜成像实时观察和追踪这些分子在活细胞中的定位、动态分布和运动过程。
组织成像:该染料还可用于标记组织切片中的特定结构或生物分子,通过荧光显微镜或荧光扫描仪成像观察组织的形态结构和生物分子表达情况。
Sulfo-CY5 NHS Ester作为一种荧光标记试剂,在细胞内结构标记领域展现出诸多应用潜力。其良好的水溶性、高荧光强度和低细胞毒性等特点使其成为生物医学研究中的工具。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)