FITC-NHS Ester,全称为Fluorescein Isothiocyanate N-Hydroxysuccinimide Ester,即荧光素异硫氰酸酯-N-羟基琥珀酰亚胺酯,是一种常用于生物偶联和荧光标记的化合物。
结构组成
FITC:即荧光素异硫氰酸酯(Fluorescein Isothiocyanate),是一种强绿色荧光染料,具有共轭双键结构,能在特定波长的光激发下发出绿色荧光,最大激发波长约为495nm,最大发射波长约为520nm。它常用于标记生物分子以进行荧光显微镜观察。
NHS:即N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide),是一种反应活性的化合物,常与异硫氰酸酯共同使用,以在生物分子上引入异硫氰酸衍生物。NHS酯具有较高的反应活性,可与生物分子中的氨基(-NH₂)在温和条件下发生特异性反应,形成稳定的酰胺键。
化学性质
荧光性质:FITC-NHS在激发波长为494nm左右的紫外光下,能够发射出绿色荧光。这种荧光特性使其在荧光显微镜、流式细胞仪和其他荧光检测系统中得到诸多应用。
活性酯性质:FITC-NHS的NHS部分使其成为一种活性酯形式的染料,可以与含有氨基(-NH2)的化合物发生偶联反应,形成稳定的酰胺键。这种反应通常在碱性条件下进行,应用于生物化学和分子生物学中,用于标记蛋白质、抗体和其他生物分子。
应用领域
生物分子标记:用于标记蛋白质、抗体、多肽、核酸等生物分子,以便通过荧光检测来研究生物分子的结构、功能和相互作用。
细胞研究:在细胞生物学研究中,FITC-NHS可用于标记细胞表面的蛋白质或细胞内的特定分子,通过荧光显微镜等技术观察细胞的形态、结构和功能变化。
免疫检测:在酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光检测等免疫分析方法中,作为标记物用于检测抗原或抗体的存在和含量。
保存与使用
保存条件:FITC-NHS通常需在-20℃或更低温度下干燥保存,避免与空气、水分接触,以防止NHS酯水解和荧光素的光漂白。
使用注意事项:使用时应在干燥的环境中进行,尽量避免溶液长时间暴露在空气中。在标记反应中,需要根据具体的生物分子和实验条件,优化反应时间、温度、pH值等参数,以获得适宜的标记效果。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)