Sulfo-CY5-COOH(磺化CY5羧酸)科研产品问答,仅参考:
问: Sulfo-CY5-COOH与Sulfo-CY5-NHS的核心区别是什么?如何选择?
答:
区别:
反应基团:Sulfo-CY5-COOH需通过羧酸活化(如EDC/NHS)与氨基结合;Sulfo-CY5-NHS是预活化的NHS酯,可直接与氨基反应。
灵活性:COOH基团可定向偶联其他基团(如氨基、巯基),适合复杂分子设计。
选择建议:
若需快速标记氨基(如抗体),优先选NHS酯;若需灵活偶联(如与氨基化纳米颗粒),选COOH版本。
问: Sulfo-CY5-COOH标记氨基化纳米颗粒的优化条件是什么?
答:参数,仅了解:
pH:7.0-7.4(避免羧酸过度质子化)。
摩尔比:染料:纳米颗粒表面氨基 = 20:1(需预滴定氨基密度)。
温度:25°C避光反应4小时(延长反应可提高标记率)。
表征:动态光散射(DLS)检测粒径变化,Zeta电位监测电荷变化(负电荷增加)。
问: 如何避免Sulfo-CY5-COOH活化过程中的副反应?
答:
控制策略:
缩短活化时间:EDC半衰期短,避免过度活化导致水解。
低温反应:适宜温度下活化减少副产物生成。
添加竞争试剂:加入甘氨酸淬灭残留活化基团。
问: Sulfo-CY5-COOH能否用于活细胞表面标记?
答:
可行方案:
氨基化细胞膜:用含伯胺的化学交联剂预处理细胞膜。
标记步骤:将活化的Sulfo-CY5-COOH与细胞在适宜温度下避光孵育。
注意事项:需严格控制EDC浓度以减少细胞毒性。
问: Sulfo-CY5-COOH与氨基分子的偶联效率低,可能原因?
答:潜在原因:
活化试剂失效(EDC易水解,需现配现用)。
反应pH不匹配(羧酸需在酸性条件活化,偶联需中性pH)。
目标分子氨基不足(如糖基化蛋白需预还原处理)。
问: Sulfo-CY5-COOH能否用于制备荧光微球?
答:
制备步骤:
微球修饰:使用氨基化聚苯乙烯微球。
偶联反应:EDC/NHS活化Sulfo-CY5-COOH后与微球避光振荡反应6小时。
纯化:离心洗涤5次去除游离染料。
应用:流式细胞术校准或免疫荧光标准品。
问: Sulfo-CY5-COOH与其他磺化染料(如Sulfo-CY3-COOH)的光谱是否重叠?
答:
光谱特性:
Sulfo-CY5-COOH:Ex/Em ~650/670 nm(远红光)。
Sulfo-CY3-COOH:Ex/Em ~550/570 nm(绿光)。
兼容性:光谱无重叠,适合多色标记(需仪器支持多通道检测)。
问: Sulfo-CY5-COOH能否用于点击化学(Click Chemistry)偶联?
答:
方案设计:
修饰CY5-COOH:将羧酸基团转化为叠氮化物(通过EDC/NHS与氨基-PEG4-叠氮反应)。
点击反应:与含DBCO(二苯并环辛炔)的目标分子在生理条件下反应。
应用:活细胞内动态标记(如代谢示踪)。
问: Sulfo-CY5-COOH标记的探针是否适用于体内成像?
答:
适用性:
优势:磺酸基团减少非特异性结合,延长血液循环时间。
限制:需大分子载体靶向富集,小分子探针易被肾脏清除。
建议:注射后2-24小时采集信号(取决于探针尺寸)。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)