Sulfo-Cy5.5-NHS（磺化Cy5.5-NHS酯）科研产品常见问题，仅参考：
问：Sulfo-Cy5.5-NHS是什么？与普通Cy5.5-NHS有何区别？
答：
Sulfo-Cy5.5-NHS 是一种水溶性近红外荧光染料，具有磺酸基团修饰，无需有机溶剂（如DMSO）溶解，可直接在水相缓冲液中标记蛋白质、抗体或核酸的氨基（-NH₂）。
区别：普通Cy5.5-NHS需用DMSO溶解，可能对某些敏感分子（如某些抗体）产生毒性；而磺酸化版本水溶性更强，更适合体内实验或活细胞标记。
问：如何标记蛋白质或抗体？操作步骤是什么？
答：
缓冲液选择：使用pH 8.5-9.0的碳酸氢钠缓冲液（避免含氨基的缓冲液如Tris，会竞争反应）。
染料与蛋白比例：推荐摩尔比 5:1~10:1（染料:蛋白），具体需优化。
反应条件：避光条件下室温搅拌1-2小时，或适宜低温下过夜。
纯化：通过脱盐柱（如PD-10）或透析去除未反应的染料。
验证：紫外-可见光谱检测标记效率（Cy5.5吸收峰约675 nm）。
问：适用于哪些实验场景？
答：
活体成像：近红外（NIR-I，675/694 nm）穿透组织能力强，适合小动物肿瘤、炎症或代谢过程的实时成像。
细胞示踪：标记抗体或纳米颗粒，追踪免疫细胞迁移（如T细胞、巨噬细胞）。
分子探针：用于FRET、荧光偏振（FP）等蛋白质相互作用研究。
外泌体/脂质体标记：通过表面蛋白氨基共价标记，追踪其在体内的分布。
问：标记时需要注意哪些问题？
答：
避光操作：Cy5.5易光漂白，全程需避光（如使用铝箔包裹容器）。
pH控制：反应缓冲液pH需严格在8.5-9.0之间（过低导致反应效率低，过高加速NHS酯水解）。
避免干扰试剂：缓冲液中不可含游离氨基（如甘氨酸、Tris）、硫醇基（-SH）或胍类物质。
问：能否与其他荧光染料（如FITC、Alexa Fluor 488）联用？
答：
可以！Cy5.5的发射波长（~694 nm）与常见绿色荧光染料（如FITC, 488/525 nm）或红色染料（如Cy3, 550/570 nm）光谱不重叠，适合多色标记或共定位分析。
建议：使用激光共聚焦显微镜或多通道小动物成像系统时，需分别设置激发/发射滤光片。
问：是否可用于体内实验？是否有毒性？
答：
适用性：Sulfo-Cy5.5-NHS因其水溶性和低毒性，用于小动物活体成像。
毒性控制：标记产物的毒性主要取决于被标记分子本身，建议通过细胞活力实验（如MTT）验证标记后复合物的生物相容性。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
