ICG-NHS ester是一种活性脂,可用于标记含有氨基(-NH2)的生物分子。在进行标记反应时,ICG-NHS ester会与目标分子中的氨基发生酰胺化反应,形成共价键结合。
标记氨基反应生物分子:
1. 准备目标生物分子:首先需要准备含有氨基的生物分子作为标记的靶点,如蛋白质、肽段或抗体等。这些生物分子可以通过合成、提取或纯化等方式获取。
2. 制备ICG-NHS ester溶液:将ICG-NHS ester溶解在适当的溶剂中,通常选择无水有机溶剂如二甲基亚砜(DMSO)或N,N-二甲基乙酰胺(DMF)。制备的ICG-NHS ester溶液应保持干燥和无水的状态,以确保反应的有效进行。
3. 反应混合:将目标生物分子与ICG-NHS ester溶液按照一定的摩尔比例混合。通常情况下,ICG-NHS ester的浓度应根据目标分子的数量和反应条件进行调整,以达到最佳的标记效果。
4. 反应条件:将反应混合物在适当的条件下进行反应。一般来说,反应温度、pH值和反应时间等因素都会对反应的效果产生影响。需要根据具体的实验要求和目标生物分子的性质来确定最佳的反应条件。
5. 反应停止:在反应完成后,需要加入适当的试剂来停止反应,以防止进一步的非特异性反应发生。常用的反应停止试剂包括氨基化合物(如氨或氢氧化钠溶液)或甲醇等。
6. 纯化和分离:完成反应后,需要对反应产物进行纯化和分离,去除未反应的ICG-NHS ester和其他杂质。常用的方法包括凝胶过滤、柱层析、离心或洗涤等。
通过以上步骤,ICG-NHS ester可以成功地与含有氨基的生物分子发生酰胺化反应,实现对这些分子的标记和修饰。标记后的生物分子可以用于荧光成像、免疫检测、细胞追踪等应用领域,为相关研究提供了工具和方法。
FITC-PEG-SH
ICG-Maleimide
ICG-Amine
ICG-Azide
RB-ConcanavalinA
FITC-ConcanavalinA
温馨提示:以上资料源自星戈瑞荧光,仅用于科研实验,2023更新。(仅用于参考)