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FITC在荧光显微镜下什么颜色?有什么注意事项?

时间:2023-07-17    阅读:1142    点赞:0

在荧光显微镜下,FITC(Fluorescein Isothiocyanate)发出绿色荧光。FITC荧光素在激发波长处于约494纳米时,发出发射波长约为525纳米的绿色荧光信号。因此,在荧光显微镜下观察标记了FITC的样品时,通常呈现出明亮的绿色荧光。这种绿色荧光可以用来标记和可视化目标物质,例如细胞结构、分子标记或荧光染色实验中的特定标记物。

 

在荧光显微镜下,FITC(Fluorescein Isothiocyanate)发出绿色荧光。FITC荧光素在激发波长约为494纳米时,发出发射波长约为525纳米的绿色荧光信号。因此,在观察标记了FITC的样品时,您可以期望看到明亮的绿色荧光。

荧光标记 

以下是使用FITC荧光素进行荧光显微镜实验时的一些注意事项:

1.适当的激发和发射滤光片:确保使用适当的激发滤光片(通常在490-505纳米范围)和发射滤光片(通常在515-530纳米范围)来捕获FITC荧光信号。这些滤光片将帮助筛选非特定的光信号,并增强FITC荧光的检测和可视化。

 

2.控制曝光时间:合理控制荧光显微镜的曝光时间,以避免过度曝光或欠曝光的情况。过度曝光可能导致信号饱和,而欠曝光可能使荧光信号不清晰或不可见。

 

3.避免光源波长的重叠:确保使用的激发光波长与FITC的最大吸收波长(约为494纳米)相匹配,以确保最佳的激发效果。同时,避免使用与FITC发射波长(约为525纳米)重叠的光源,以减少背景荧光的干扰。

 

4.避免样品伪荧光:某些样品本身可能具有自发荧光,因此在观察FITC荧光时要注意区分真实的FITC荧光信号和样品自发荧光。这可以通过对未标记的样品和阴性对照进行对比来帮助鉴别。

 

5.适当的控制组:在荧光显微镜实验中,建议使用适当的阳性对照和阴性对照,以验证FITC标记的样品和荧光信号。阳性对照应显示预期的FITC荧光,而阴性对照应显示较低或无荧光信号。

 

这些注意事项有助于获得清晰、可靠的FITC荧光显微镜图像,并避免背景干扰或误解读结果。根据具体实验需求,还可以根据荧光显微镜仪器和实验条件进行进一步的优化和调整。

 

FITC-COOH

FITC-OH

HSA-FITC

Mal-PEG5K-cyclo(RGDfk)

BSA-CY5.5

CY7-Dextran MW:10K

CY7-Dextran MW:1000K

CY7-Dextran MW:20K

dex100K-CY5

CY3-Dextran

Streptavidin-RB

Streptavidin-CY3

Avidin-ICG

CY7-Dextran MW:5K

 

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