Sulfo-Cy3 alkyne与生物分子的偶联反应是通过点击化学反应,将具有炔基的Sulfo-Cy3 alkyne与带有Azide官能团的生物分子(如蛋白质、核酸、糖类等)特异性共价结合。这种反应通常被称为“点击化学标记”或“炔基-异构化酶偶联”反应。
偶联反应步骤:
1. 准备Sulfo-Cy3 alkyne荧光探针的工作溶液:
- 根据实验设计和所需偶联的生物分子数量来确定Sulfo-Cy3 alkyne的适当浓度。一般来说,应根据厂家提供的建议进行稀释。
- 将Sulfo-Cy3 alkyne溶液在适当的缓冲液中配制,确保Sulfo-Cy3 alkyne在偶联实验中的稳定性和适应性。
2. 生物分子的准备:
- 选择目标生物分子样品,可以是纯化的蛋白质、核酸或糖类,也可以是细胞或组织中提取的复杂样品。
- 确保生物分子样品的纯度和稳定性,因为偶联的特异性和有效性与生物分子的质量和状态密切相关。
3. Sulfo-Cy3 alkyne与生物分子的偶联反应:
- 向生物分子样品中添加适量的Sulfo-Cy3 alkyne工作溶液。偶联反应需要点击化学反应催化剂,例如Cu(I)离子。
- 孵育反应混合物在适当的温度下(通常在室温下进行)一段时间,例如1小时。点击反应会将Sulfo-Cy3 alkyne与生物分子中含有Azide官能团的基团共价结合。
4. 偶联反应的停止和纯化:
- 添加点击反应停止剂(如EDTA)以停止反应。
- 进行纯化步骤,去除未反应的Sulfo-Cy3 alkyne和其他试剂。可以使用凝胶过滤、柱层析或其他适用的纯化方法。
5. 偶联生物分子的质量检测:
- 使用相应的生物学分析方法确定偶联后生物分子的浓度和纯度,确保偶联的数量和效率。
完成以上步骤后,就可以对偶联的生物分子进行荧光成像、流式细胞分析、免疫印迹等实验,以实现对特定生物分子的高度选择性标记和检测。这种点击化学反应在生物学研究中具有应用,因为它提供了一种特异性高、效率高的生物分子标记方法,对于细胞成像、蛋白质亚细胞定位和生物分子相互作用等研究意义。
CY7 DBCO
Sulfo-CY7 DBCO
CY3-Hylauronic acid
ICG-Dextran
RB-Dextran
FITC-CM-Dextran
Sulfo-CY5 NHS ester
Sulfo-CY3.5 COOH
Sulfo-CY3 COOH
CY5 hydrazide
CY5-Hylauronic acid
CY5 maleimide
ICG-BSACY3 alkyne
Sulfo-CY3 hydrazide
CY3 NHS ester
CY5.5 amine
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