CY3 NHS ester是一种荧光染料,通过与蛋白质中的游离氨基(-NH2)反应,形成共价结合,实现蛋白质的标记。标记完成后,可以利用荧光显微镜等荧光成像技术对标记的蛋白质进行可视化成像。
蛋白质标记和荧光成像的基本步骤如下:
1. 准备CY3 NHS ester溶液:将CY3 NHS ester溶解在适当的溶剂中,制备成一定浓度的溶液。同时,准备适当的缓冲液,以确保标记反应在合适的pH值下进行。
2. 蛋白质标记:将CY3 NHS ester溶液与要标记的蛋白质样品混合,使其发生特异性的共价结合。这个反应通常在室温下进行,并在缓冲液中进行,以确保反应的高效率和特异性。
3. 洗涤:标记完成后,对样品进行洗涤,去除未反应的CY3 NHS ester和其他杂质。这有助于提高标记蛋白质的纯度,并降低自发荧光的背景信号。
4. 荧光显微镜观察:将标记完成的蛋白质样品放置在荧光显微镜下,使用合适的荧光滤波器和激发波长,可以观察到CY3的荧光信号。CY3的荧光发射波长在红色范围内,适用于低背景自动荧光的条件下进行成像。
5. 数据分析:通过荧光显微镜观察的图像和视频,可以获取蛋白质标记的荧光信号。这些数据可以用于研究蛋白质的定位、相互作用和功能,以及细胞中的蛋白质表达水平和分布情况。
蛋白质标记和荧光成像是生物学研究中常用的技术手段,可以帮助研究者深入了解蛋白质在细胞中的行为和功能。CY3 NHS ester作为荧光标记剂,具有稳定的荧光性能和特异性的共价结合能力,使其在蛋白质标记和荧光成像中得到应用。
CY5 tetrazine
Avidin-FITC
Avidin-CY5
Cy5-ConcanavalinA
Cy3-Concanavalin A
ICG-Dextran
CY5 DBCO
Sulfo-CY5 DBCO
DBCO
CY3-Hylauronic acid
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