点击反应是一种高效、特异性和快速的化学反应，可用于将CY7 alkyne荧光染料与含有Azide官能团的生物分子特异性地结合。该反应称为"Copper(I)-catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition"（CuAAC），通常简称为点击反应。这个反应的关键步骤涉及铜催化的炔烃和偶氮化物的环加成，生成1,2,3-三氮唑环。
点击反应的步骤如下：
1. CY7 alkyne荧光染料：CY7 alkyne是一种含有炔烃官能团的荧光染料。它的炔烃官能团可以作为点击反应的"炔烃"部分。
2. 含Azide官能团的生物分子：目标生物分子需要含有Azide官能团。在实验设计中，可以将Azide官能团引入到目标生物分子中，例如通过化学合成或基因工程方法。
3. 铜催化剂：在点击反应中，铜催化剂通常是用来促进炔烃和Azide官能团的环加成反应。铜离子（Cu(I)）在反应中起到催化剂的作用，但在细胞或生物体内有毒性，因此需要谨慎使用。
4. 环加成反应：将CY7 alkyne荧光染料和含有Azide官能团的生物分子混合，并添加铜催化剂。在适当的条件下（例如适当的温度和反应时间），CY7 alkyne和Azide官能团会发生环加成反应，形成稳定的1,2,3-三氮唑环，完成点击反应。
点击反应的优点包括反应快速，产率高，对生物体系友好，以及反应产物稳定性好。这使得CY7 alkyne荧光染料与Azide官能团的点击反应成为生物标记和细胞成像等领域中的工具和技术。然而，对于细胞实验和体内应用，需要注意铜催化剂的毒性和细胞渗透性问题，因此需要进行合适的控制和优化。
Sulfo-CY5 NHS ester
Sulfo-CY3.5 COOH
CY7
SiR-PEG4-Me-tetrazine
SiR-PEG4-DBCO
SiR-PEG4-tetrazine
ICG-DBCO
Sulfo-CY3 NHS ester
CY3 hydrazide
CY5 hydrazide
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