五甲川花菁染料标记活性酯Cy5-NHS是一种荧光标记试剂,属于Cyanine染料家族的成员。它主要用于将Cyanine5荧光染料共价标记在含有氨基基团的生物分子上,如蛋白质、肽段、氨基酸、核酸等。在标记过程中,活性酯Cy5-NHS与目标生物分子中的氨基基团发生共价反应,形成稳定的共价连接,使目标分子获得荧光性质。
Cyanine5是一种长波长的荧光染料,其在激发后产生红色荧光,具有较高的荧光量子产率和光稳定性。这使得Cyanine5标记的样本能够产生强烈的、稳定的荧光信号,应用于细胞生物学、分子生物学、生物化学、免疫学等领域的研究。
Cy5-NHS注意事项
在使用Cy5-NHS(Cyanine5 NHS ester)进行荧光标记实验时,需要注意以下事项:
1. 实验操作:在进行标记实验时,应严格遵守实验室安全操作规程,佩戴适当的个人防护装备,避免接触眼睛、皮肤和口鼻等部位。实验室应设有合适的荧光实验台或设施,以防止荧光泄漏和交叉污染。
2. 质量控制:购买Cy5-NHS试剂时应选择可靠的供应商,确保试剂质量。在实验前进行试剂质量控制,例如检查纯度、溶解性和荧光强度等,以确保标记效率和标记稳定性。
3. 反应条件:标记实验中的反应条件(如反应时间、反应温度、反应pH等)应根据具体标记对象和实验要求进行优化。注意避免过长的反应时间和过高的反应温度,以避免非特异性结合或目标分子的损伤。
4. 溶剂选择:Cy5-NHS ester通常在有机溶剂(如DMSO、DMF等)中具有较好的溶解性。在标记实验前,将Cy5-NHS ester适当地溶解在有机溶剂中制备工作溶液。
5. 光稳定性:标记的样品在实验过程中应避免长时间的光照,尤其是紫外光照射,以防止荧光信号的衰减和光漂白现象。
6. 储存条件:未使用的Cy5-NHS ester应存储在干燥、阴暗、低温的条件下,避免潮湿和光照,以保持其稳定性。
7. 标记对象的选择:Cy5-NHS ester适用于含有氨基基团的生物分子,如蛋白质、肽段、氨基酸和核酸等。在标记实验前,需确认目标分子中含有可供Cy5-NHS ester反应的氨基基团。
8. 对照实验:为了验证标记实验的特异性和成功性,建议设置相应的阴性对照和阳性对照实验。
总体来说,使用Cy5-NHS ester进行标记实验需要仔细规划实验方案,合理优化反应条件,并进行适当的质量控制和对照实验,以确保实验结果的可靠性和准确性。
CY3 tetrazine
CY7 DBCO
Sulfo-CY5.5 COOH
CY7 COOH
Sulfo-CY7 COOH
CY7 alkyne
Sulfo-CY7 alkyne
CY3 maleimide
CY5 tetrazine
Avidin-ICG
Avidin-RB
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