Cyanine5-alkyne在蛋白质标记中应用点击化学反应，是一种高效、特异性和可逆性的方法，用于将CY5荧光染料与蛋白质结合。这种方法相比传统的蛋白质标记方法具有许多优势，因为它不依赖于特定氨基酸残基，而是通过与蛋白质表面暴露的偶极炉官能团（例如炔基）发生共轭加成反应。
蛋白质标记的步骤通常包括以下几个步骤：
1. 蛋白质预处理：首先，需要将目标蛋白质提取或表达纯化，并在适当的缓冲液中处理。
2. 偶联反应：将CY5-alkyne与蛋白质样品进行偶联反应。这种反应通常是在缓冲液中进行，并通过点击化学反应实现。在此过程中，CY5-alkyne中的炔基与蛋白质表面的偶极炉官能团发生共轭加成反应，将CY5荧光染料牢固地连接到蛋白质上。
3. 纯化与洗涤：完成偶联反应后，需要对样品进行纯化和洗涤，以去除未反应的CY5-alkyne和其他杂质。
4. 验证与应用：最后，通过分光光度计或荧光光度计等方法验证蛋白质标记的成功，并根据需要将标记的蛋白质用于不同的实验或应用，例如细胞成像、蛋白质相互作用研究等。
Cyanine5-alkyne作为蛋白质标记的荧光探针具有许多优点，包括高度特异性、反应快速、荧光信号强度高和光稳定性好等。因此，在蛋白质研究中，CY5-alkyne被用于研究蛋白质的定位、表达水平、相互作用以及蛋白质在细胞和组织中的动态分布等。这些应用为研究蛋白质的功能和调控提供了工具和技术支持。
SiR-PEG4-Maleimide
SiR-PEG4-COOH
Sulfo-CY7 NHS ester
CY5.5 COOH
Sulfo-CY5.5 COOH
CY7 COOH
CY7 hydrazide
Sulfo-CY7 hydrazide
CY3 tetrazine
Sulfo-CY3 tetrazine
ICG-DBCO
Sulfo-CY3 NHS ester
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