氰基5马来酰亚胺是一种单活性染料,其选择性地与硫醇基团(例如,与肽和蛋白质中的半胱氨酸)偶联,以产生标记的偶联物。
Sulfo-Cyanine3 maleimide水溶性硫醇反应性黄色发光染料。
Cy3 (Cyanine3) 是一个传统的蛋白质和核酸的橙红色荧光标记物。Cy3一般偏脂溶性,水溶性较低,在水相标记反应时常常需要使用有机共溶剂,常用有机溶剂包括DMF,DMSO和乙腈等。
免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体)
免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素
荧光产生是物质在吸收入射光的过程中,光子的能量传递给物质分子,分子被激发,处于激发态的分子不稳定,可通过辐射跃迁的衰变过程而返回基态,衰变过程伴随着光子的发射,即产生荧光。一些能产生荧光的物质可以运用到生物染色剂中,我们称之为荧光染料(荧光色素)或荧光探针。
蛋白荧光标记技术是目前常见的蛋白体外标记技术,利用级联放大反应原理,将极度敏感性且易于检测的荧光素通过某个基团吸附或共价结合后,标记到特异性抗原或抗体分子上,应用荧光显微镜观察荧光标记物因增强放大效应而产生颜色、光谱等变化,以分析示踪相应抗体或抗原性质与含量的方法。
荧光蛋白是一种常用的报告蛋白,能在特定波长激发光作用下,发出相应的荧光信号。利用分子生物学方法将荧光蛋白与外泌体膜上的标记蛋白,如CD63、CD9、CD81等融合表达可以跟踪外泌体从供体到受体细胞的轨迹。通过监测膜蛋白的荧光,亦可实现活体培养物中外泌体转移的可视化观察。常用的荧光蛋白有绿色荧光蛋白GFP和红色荧光蛋白RFP等。
吡咯硼(BODIPY)是以硼二吡咯(boron-dipyrromethene)为荧光结构母核的一类新型的荧光染料,其主要特点是结构非对称性,使得BODIPY衍生物拥有更多应用范围。