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实验室小知识-异硫氰酸荧光素FITC光谱、稳定性、溶解及应用

时间:2023-03-06    阅读:2445    点赞:1

  FITC(异硫氰酸荧光素)是一种荧光素衍生物。常作为荧光探针应用于制备分子生物学或糖类聚合物的结合物分子,例如葡聚糖、壳聚糖、活性基团等。FITC常用作蛋白质或多糖的不同底物的标记试剂,以及标记抗体(IgG)以及其它免疫应用。

 

光谱性质:

  FITC在λ= 495 nm处有激发波长的峰值,在λ = 519 nm处有发射波长的峰值。该化合物是黄色的,而发射光则是绿色的。FITC两种异构体的激发和发射波长的差别是很小的。FITC标记的功能性生物聚合物,如FITC标记葡聚糖,具有与母体分子相似的激发和发射特性。

 FITC

稳定性和溶解度:

  如储存得当,FITC相当稳定。FITC粉末在0到8℃避光避湿环境下可保存超过2年。FITC溶液以及多种FITC标记的功能化产品溶液,据报道易发生光漂白现象。因此FITC溶液应避光保存,在制备后马上使用,尤其是用于FITC荧光成像时。

FITC溶于二甲基亚砜和其它极性有机溶剂,如甲酰胺和N,N-二甲基甲酰胺,但水溶性很差。

 

应用:

  FITC的应用包括抗体的荧光标记和流式细胞术。FITC标记的功能化产品(如FITC标记葡聚糖)对于各种细胞和组织和眼组织的渗透性和传输研究,以及大脑和神经系统相关研究都是有报道的。

  1973年de Belder和Granath发表了荧光素标记葡聚糖及FITC标记的衍生物。现在荧光素标记多糖的制备是一种常见的方法。

  FITC标记葡聚糖和其它FITC结合多糖可以应用于微循环研究。

  FITC标记葡聚糖也用于研究白细胞粘附、大分子渗漏和再灌注期间微循环的渗漏。

  FITC葡聚糖也被用于研究粘膜微循环。



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