荧光探针是能对特定刺激(如温度、pH、特定物质或离子等)产生响应或对生物标本特定区域进行定位的荧光团(荧光染料)。
荧光探针至少有两部分构成:一部分是具有反应或者识别功能的部分(与靶标特异性结合的受体)﹔另一部分是具有信号输出功能的部分(发射荧光的荧光基团),由连接基团(或没有)连接组成。
荧光探针的条件:
1.特异性结合;
2.荧光量子产率始终比较高;
3.荧光探针的荧光与生物样品的背景荧光有所区别;
4.不影响被研究生物分子的结构和特性;
5.溶解性要好,且溶解后不和其他物质发生化学反应;
6.无毒或毒性小。
荧光探针的应用:
1.细胞水平荧光成像:细胞器染料,活性氧(ROS)、活性氮(RNS)检测染料,细胞存活率检测试剂盒。
2.生物化学检测:生物活性探针,Ca+检测试剂(金属离子代谢检测)。
3.蛋白质试剂:磷酸化蛋白、糖基化蛋白的分离与纯化试剂,转氨酶与磷酸水解酶等酶活性检测试剂。
4.标记染料:多种化学活性荧光染料、荧光猝灭剂,用于生物分子的标记(如蛋白质、核酸、生物膜等的标记)。
荧光探针分类:PH探针、NO荧光探针、ROS乏氧探针、荧光离子探针、荧光金属探针、膜电位探针、UV-tracer 探针、细菌成像的荧光探针、谷胱甘肽探针等等。