生物素，是一个小分子，经活化后可与蛋白、抗体等生物大分子结合，不仅可以很好地保持大分子的生物活性，而且与亲和素结合使用时具有多级放大作用。可用于免疫沉淀、免疫检测(ELISA) 及各类核酸、蛋白质杂交反应，可大幅度缩短吸附生物素标记分子所需的时间并简化操作设备。
生物素分类：
标记蛋白质氨基的活化生物素： N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS) 。
标记蛋白质醛基的活化生物素：酰肼(BHZ) 和肼化生物胞素(BCHZ) 。
标记蛋白质巯基的活化生物素：3(- N-马来酰亚胺-丙酰) -生物胞素(MPB) 。
标记蛋白质核酸的活化生物素：常用于标记核酸分子的活化生物素有光生物素、生物素脱氧核苷三磷酸、 BNHS 和 BHZ。
生物素标记注意事项：
1.标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当的比例，用 BNHS量过量也是不利的，抗原的结合位点可能因此被封闭，导致抗体失活。
2.生物素与蛋白质结合后，不影响免疫活性；标记酶时则结果有不同，碱性磷酸酶标记后活性将降低；
3.活化生物素通过侧链与蛋白分子连接，可与不同的功能基团，如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基，也可与糖基共价结合；
4.一个蛋白分子可被多个生物素标记；
5.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在，会抑制标记反应。因此，蛋白质在反应前要对 NaHCO3 Buffer (0.1 M, pH 8.0) 或 H3BO3Buffer(0.5M ,pH 8.6) 充分透析。
