一、产品概述
FITC-NHS(异硫氰酸荧光素-N-羟基琥珀酰亚胺酯)是一种常用于生物分子标记和细胞成像的荧光探针。它通过NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)基团与生物分子中的氨基(如蛋白质、多肽、抗体等)发生特异性反应,形成稳定的共价键,从而实现荧光标记。FITC-NHS以其高荧光强度、稳定性好、易于操作等优点,在生物医学研究和药物开发等领域得到诸多应用。
二、产品特性
荧光特性:FITC-NHS在特定波长下激发后,能发出明亮的绿色荧光,便于观察和检测。
稳定性:FITC-NHS具有良好的稳定性,能在较宽的温度和pH范围内保持活性。
反应特异性:FITC-NHS的NHS基团能与生物分子中的氨基发生特异性反应,形成稳定的共价键,从而实现荧光标记。
溶解性:FITC-NHS易溶于水和有机溶剂,便于实验操作。
三、使用(建议现配现用,溶解后尽快使用。不要溶解后保存)
准备工作:确保实验环境干净、整洁,准备好所需的实验器材和试剂。
溶解FITC-NHS:将适量的FITC-NHS粉末溶解于DMSO、DMF等,得到所需浓度的FITC-NHS溶液。注意避光操作,防止荧光淬灭。
标记生物分子:将待标记的生物分子(如蛋白质、多肽、抗体等)与适量的FITC-NHS溶液混合,调整反应体系的pH值(一般为7.0-9.0),在室温下反应一定时间。注意控制反应温度和时间,以获得最佳标记效果。
终止反应:加入合适的适量的氨基化合物,以消耗剩余的NHS基团,终止反应。
纯化:根据实验需要,可选择透析、离心等方法去除未反应的FITC-NHS和其他杂质,得到纯化的标记产物。
分析和检测:使用荧光光谱仪、流式细胞仪等设备对标记产物进行分析和检测,评估标记效果。
四、注意事项
操作过程中应尽量避免荧光淬灭,尽量使用避光容器和避光操作。
溶解FITC-NHS时,应确保充分溶解,避免产生沉淀。
标记生物分子时,应控制反应体系的pH值和温度,以获得标记效果。
纯化过程中应注意去除未反应的FITC-NHS和其他杂质,以提高标记产物的纯度和质量。
标记产物应妥善保存,避免长时间暴露在空气中或强光照射下。
五、应用实例
FITC-NHS可用于多种生物分子的荧光标记,如蛋白质、多肽、抗体等。以下是一个简单的应用实例:
将待标记的抗体与适量的FITC-NHS溶液混合,调整反应体系的pH值和温度,在室温下反应一定时间。
终止反应后,使用透析袋将标记产物进行透析,去除未反应的FITC-NHS和其他杂质。
将纯化后的标记抗体与细胞进行孵育,使用流式细胞仪检测细胞的荧光信号,从而评估抗体的结合能力和特异性。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)