FITC，异硫氰酸荧光素，又称为荧光素-5-异硫氰酸盐，形态外观黄色粉末，有吸湿性，易溶于水和酒精溶剂，在避光干燥条件下可保存，是一种生化试剂。
它能与各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中仍有强烈绿色荧光，加酸后析出沉淀，荧光消失。通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的R氨基与FITC荧光素的硫碳胺键结合，形成FITC蛋白质结合物。
FITC标记蛋白方法：
（1）将待交联的蛋白（浓度≥1mg/mL）对交联反应液透析三次4℃，至pH=9.0。交联反应液配制方法：7.6gNaHCO3，1.06gNa2CO3，7.36gNaCl，加水定容至1L。
（2）将FITC溶于DMSO中，浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制，避光。
（3）按P:F（蛋白质：FITC）=1mg:150μg的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中，边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀，暗处4℃反应8h。
（4）加入5mol/L的NH4CL至终浓度50mmol/L，4℃终止反应2h。
（5）将交联物在PBS中透析四次以上，至透析液清亮。
（6）交联物的鉴定
蛋白浓度（mg/mL）=[A280-0.31×A495]/1.4
F/P比例：3.1×A495/[A280-0.31×A495]，该值应介于2.5～6.5之间。
（7）FITC交联的蛋白应置于Ph7.4的磷酸盐缓冲液中，加入0.1%NaN3、1%BSA,4℃避光保存。
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